Personagens Principais

Leon e Ashley.

O protagonista de RE4 é Leon S. Kennedy, sobrevivente de Raccoon City, que agora trabalha como agente secreto para o governo americano. Leon deve investigar a suspeita de Ashley Graham, a filha do presidente, que foi seqüestrada, estar numa remota vila na Espanha. Leon é auxiliado por Ingrid Hunnigan, que lhe dá informações sobre o terreno. O principal antagonista é Osmund Saddler,

Personagens Secundários

Ada Wong

É a personagem coadjuvante do segundo e quarto jogos da série Resident Evile protagonista do capítulo Death´s Door do game Resident Evil: Umbrella Chronicles. É dublada pela atriz Sally Cahill nos segundo e quarto games da série.Embora durante o game não tenha sido especificada a sua origem,acredita-se que a personagem tenha origem chinesa dadas as suas feições e seu nome.

Seis anos depois em Resident Evil 4,Ada é enviada com a missão de investigar o culto de Osmund Saddler e conseguir uma amostra das Las Plagas,encontra-se novamente com Leon que esta agora como agente do governo em busca de Ashley Graham,filha do presidente dos Estados Unidos,também fica incubida da missão de matar Jack Krauser,um outro espião enviado para conseguir as Las Plagas,enviado por Albert Wesker.

Na versão de Nintendo Gamecube,Ada protagonizou o minigame Assignment Ada (Ada the Spy no Japão),onde sua missão era recolher 5 amostras do parasita.Nas versões posteriores de Resident Evil 4,além de Assignment Ada, ela esta disponível em um modo extra chamado Separated Ways (The Another Order na versão japonesa), na qual são realizadas 5 missões para desvendar o que foi feito por Ada durante o jogo.Ada também é um dos personagem disponíveis no minigame Mercenaries, após completar o mapa da Vila Pueblo com 4 estrelas ou mais no ranking.

Luis Sera 

é um personagem de Resident Evil 4. Ele afirma tertrabalhado anteriormente como um policial em Madrid após o primeiro encontro Leon S. Kennedy. No entanto, mais tarde eleadmite a Leon que ele é realmente um pesquisador que trabalhapara Saddler Osmund. Além disso, o relatório sobre Ada Seraafirma que ele estudou bioquímica na universidade, antes de ir para estabelecer-se como um brilhante pesquisador científico.